Kontrola jakości diet hydrolizowanych

W praktyce klinicznej do często obserwowanych objawów dermatologicznych u psów i kotów zalicza się niekorzystne reakcje na pokarm (AFR – adverse food reactions). Komercyjne diety są wykorzystywane zarówno w diagnostyce (w czasie diety eliminacyjnej, którą opisano na str. 44), jak i podczas właściwego leczenia. Dostępne są dwa rodzaje takich diet:

1. diety białkowe selektywne (selected) lub nowatorskie (novel) zawierające ograniczone źródła białka i, najlepiej, jedno źródło węglowodanów,

2. diety hydrolizowane składające się częściowo lub całkowicie zhydrolizowanego białka. Zidentyfikowano wiele różnych, potencjalnych

Przyczyn niepowodzenia diet eliminacyjnych. Do dwóch głównych problemów zalicza się brak pewności, że diety są wolne od przypadkowych białek (jako, że potencjalne skażenie krzyżowe w fabrykach jest poważnym problemem) w przypadku karm selektywnych oraz w przypadku hydrolizowanych – gwarantowany poziom hydrolizy bez obecności fragmentów uczulających. W ostatnio przeprowadzonych badaniach wykazano, że niektóre diety komercyjne (głównie „bez recepty”) przeznaczone dla zwierząt z AFR zawierają niezadeklarowane składniki i/lub białka o dużej masie cząsteczkowej. W przypadku ok. 75% testowanych karm stwierdzono rozbieżności pomiędzy wynikami analizy białek a oznakowaniem produktu 1 2 3. W związku z powyższym, aby uniknąć krzyżowego zanieczyszczenia gotowych diet potrzeba spełnienia trzech kluczowych warunków – niezbędne są: w pełni scharakteryzowane surowce, dopasowane do potrzeb urządzenia przemysłowe i procesy czyszczenia oraz optymalne kontrole analityczne. 

W niedawnych badaniach potwierdzono specyficzny skład białkowy diet Royal Canin’s Anallergenic (Ultamino w Ameryce Północnej), który opiera się na ekstensywnie zhydrolizowanych piórach drobiowych i skrobi kukurydzianej, a także skuteczność procesu zarządzania ryzykiem zanieczyszczenia krzyżowego w firmie Royal Canin.

• Skład białek badano za pomocą chromatografii o wysokiej czułości, elektroforezy oraz technik proteomicznych w niezależnym laboratorium. Uzyskane wyniki potwierdziły wysoki poziom hydrolizy białka (ryc. 1), nieobecność białka we wzmacniaczach smaku (zawartych w powłoce granulek) oraz brak zanieczyszczenia krzyżowego 4. Stwierdzono obecność powszechnej glikoproteiny kukurydzianej GBSS (syntazy związanej z granulami skrobiowymi), która jak dotąd nie spowodowała żadnych działań niepożądanych u zwierząt domowych, i nie wykryto białek przenoszących lipidy (LTP), które są znane z działania alergizującego. Podobne wyniki uzyskano w przypadku diet dla psów i kotów 4.

• Ryzyko zanieczyszczenia krzyżowego ocenia się, testując każdą partię produkcyjną za pomocą specyficznej analizy DNA złożonej z 3 etapów (ryc. 2). Metoda ta obejmuje pomiar całkowitej zawartości DNA w diecie i porównanie uzyskanych wyników z progiem zgodności ustalonym podczas wieloośrodkowego badania przedklinicznego 5. W przypadku wykrycia ilości DNA powyżej tego progu, przeprowadza się analizy PCR w celu zidentyfikowania źródła zanieczyszczenia. Aby skorelować DNA z niechcianymi białkami, stosuje się krzywe kalibracji do oceny rzeczywistych stężeń obecnego białka.

Od wprowadzenia do użytku w 2011 r. metoda ta została zastosowana do przetestowania ponad 2500 partii produkcyjnych Anallergenic, z których wszystkie zostały uznane za zgodne z wymaganymi normami. Warunkowało to przekazanie produktów do sprzedaży.

Podziękowania dla Mars Petcare Central Laboratory, Aimargues (Francja) oraz Luxembourg Institute of Science and Technology.

Ze względu na drobiazgowy system kontroli jakości (staranny dobór surowców, szczegółowe protokoły produkcyjne i metody czyszczenia oraz rygorystyczne testy DNA), w opisanych dietach nie występuje żadne zanieczyszczenie krzyżowe, co wraz z udowodnioną ekstensywną hydrolizą białek zapewnia optymalną niezawodność kliniczną i skuteczność stosowania Anallergenic w diagnostyce i terapii AFR 6 7 8.